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Haematologic HCX-0050說明書

發布時間:2018/10/15      點擊次數:1293

Haematologic HCX-0050說明書

HTI HCX-0050

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化,蛋白質修飾,化驗開發,合同制造和合同研究。

 

Haematologic  HCX-0050說明書

Coagulation Factor X

凝血因子IX

因子X
的結構域結構表示因子X的結構域結構,其中:GLA =含有γ-羧基谷氨酸殘基的區域,EGF =含有與人表皮生長因子同源的序列的區域,AP =在酶原轉化為時釋放的活化肽。活性絲氨酸蛋白酶,催化域=含有絲氨酸蛋白酶催化三聯體的區域。箭頭表示在酶原激活期間被因子Xase蛋白水解切割的位點。

 

 

  •  

HCX-0050 人因X

尺寸

100微克,1毫克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

凝血試驗

保質期(妥善保存)

12個月

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 HCX-GD Human gla-domainless Factor X 

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尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

凝血試驗

保質期(妥善保存)

12個月

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 BCX-1050 牛因子X

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尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

凝血試驗

保質期(妥善保存)

12個月

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 MCX-5050 Mouse Factor X

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尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

凝血試驗

保質期(妥善保存)

12個月

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因子X是維生素K依賴性蛋白質酶原,其在肝臟中合成并作為通過二硫鍵連接的雙鏈分子在血漿中循環(1,2)。在分泌到血漿中之前,翻譯后修飾產生11個γ-羧基谷氨酸(gla)殘基和單個b-羥基天冬氨酸殘基,它們位于NH2-末端輕鏈內。輕鏈還含有兩個表皮生長因子(EGF)同源結構域。因子X的COOH-末端重鏈含有大部分碳水化合物部分,以及潛在的絲氨酸蛋白酶結構域。因子X的活化由內因子Xase復合物(因子IXa,因子VIIIa,細胞表面和鈣離子)或外在因子Xase復合物(因子VIIa,組織因子,細胞表面和鈣離子)催化。通過復合物激活人因子X導致COOH-末端重鏈的Arg52-Ile53處的切割和隨后釋放的52氨基酸活化糖肽。因子Xa然后用作凝血酶原酶復合物的酶組分,其負責凝血酶原快速轉化為凝血酶。gla殘基使因子X / Xa以鈣依賴性方式結合磷脂(即細胞表面); 組裝凝血酶原酶復合物的要求。個EGF同源結構域含有Ca2 +結合位點,其作為鉸鏈使EGF和GLA結構域彼此折疊(12)。該分子區域參與細胞結合域的識別。

通過常規技術(3)和免疫親和層析(4)的組合從新鮮冷凍的人血漿中分離人因子X. 除了標準的人因子X制劑外,還可獲得Gla無結構域人因子X. 使用Bajaj等人報道的方法的改進,從新鮮牛血漿中分離牛因子X. (5,6)。純化的酶原以50%(體積/體積)甘油/ H 2 O供應,應儲存在-20℃。通過SDS-PAGE分析確定純度,并在因子X凝固測定中測量活性。

 

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人因子X,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標準

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

 

本土化

等離子體

血漿濃度

10μg/ ml

行動方式

酶原; 絲氨酸蛋白酶因子Xa的前體

分子量

58,900(人類)(7)
55,100(牛)(8)

消光系數

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 11.6(人類)(9)

 

 

= 12.4(牛)(10)

 

等電點

4.9-5.2(人類)(9)
4.8-5.2(牛)(9)

結構體

兩個亞基,Mr = 16,200和42,000(人類),Mr = 16,500和39,300(牛),NH2末端gla結構域和兩個EGF結構域

碳水化合物百分比

15%(人)(7)
10%(牛)(8)

翻譯后修改

11個gla殘基(7,8)
一個β-羥基天冬氨酸

 

 

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