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abeomics 17-1101說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2022-09-26      點(diǎn)擊次數(shù):1146

abeomics 17-1101說(shuō)明書(shū)


螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒

Leeporter™ 螢光素酶檢測(cè)試劑 - 1000 測(cè)試

產(chǎn)品編號(hào):17-1101

應(yīng)用 :功能分析
數(shù)量 :1 個(gè)套件
內(nèi)容 :1000 次測(cè)試(96 孔板格式)。檢測(cè)緩沖液含有 0.01% 疊氮化納
儲(chǔ)存情況 :儲(chǔ)存于 -20°C

Leeporter™ 螢光素酶檢測(cè)試劑經(jīng)過(guò)專(zhuān)門(mén)配制,可與表達(dá)優(yōu)化的細(xì)胞內(nèi)海腎螢光素酶的 Leeporter™(螢光素酶報(bào)告基因)細(xì)胞系一起使用,該細(xì)胞系旨在產(chǎn)生高度敏感的信號(hào)和延長(zhǎng)的信號(hào)強(qiáng)度。作為一步發(fā)光檢測(cè)試劑,Leeporter™ 螢光素酶檢測(cè)試劑可以直接添加到與所使用的光度計(jì)兼容的細(xì)胞培養(yǎng)板中,無(wú)需稀釋或?qū)⑴囵B(yǎng)上清液或細(xì)胞裂解物轉(zhuǎn)移到其他板上。




協(xié)議:

1) 底物 (100X) 重構(gòu):
將 0.5 ml 底物重構(gòu)溶液添加到凍干底物瓶中,通過(guò)輕輕上下吹打和/或倒置試管*溶解。重構(gòu)的 100X 底物可在 -20 o C 的黑暗環(huán)境中儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)一個(gè)月。
2) 檢測(cè)緩沖液:
在室溫水浴中解凍 50 ml 的檢測(cè)緩沖液,并通過(guò)旋轉(zhuǎn)和/或輕輕渦旋*溶解任何沉淀物,直到溶液變得澄清。Assay Buffer 可以分裝(例如每份 5-10 ml)并在 -20 o C 下保存數(shù)月。
3) 完整檢測(cè)溶液的制備(適用于 96 孔板格式):
為每次使用新鮮制備完整的檢測(cè)溶液,應(yīng)在 2 小時(shí)內(nèi)使用。解凍檢測(cè)緩沖液并通過(guò)渦旋和/或溫和渦旋平衡至室溫。計(jì)算需要多少完整的測(cè)定溶液(注意:96 孔板的每個(gè)孔需要 50 ul 的完整測(cè)定溶液)。將適量的 Assay Buffer 分裝到 15 ml 試管中,并加入相應(yīng)量的重構(gòu) 100X 底物,制成最終的 1X 底物檢測(cè)溶液。
4) 螢光素酶檢測(cè)(96 孔板格式):

1. 在白色實(shí)心底 96 孔微孔板(注意:使用的 96 孔板應(yīng)與正在使用的光度計(jì)兼容)中以 100 ul 細(xì)胞/孔,根據(jù)相應(yīng)的用于您的目標(biāo) Leeporter™ 細(xì)胞系的方案(注意:每個(gè)目標(biāo) Leeporter™ 細(xì)胞系方案都可以在其相應(yīng)的數(shù)據(jù)表中找到。)。[每孔總體積為 100 uL ]

2. 根據(jù)您的目標(biāo) Leeporter™ 細(xì)胞系的相應(yīng)方案刺激或處理您的目標(biāo)細(xì)胞。[每孔總體積變?yōu)?105~110 uL = 100 ul 細(xì)胞 + 5~10 ul 處理]

3. 完成目標(biāo)細(xì)胞的刺激/處理后,將含有待測(cè)目標(biāo)細(xì)胞的 96 孔板平衡至室溫 10 分鐘(注意:不要移除或擾亂細(xì)胞培養(yǎng)基。)。

4. 使用多道移液器,將 50 ul Complete Assay Solution 直接加入每個(gè)板孔中(注意:添加 Assay Reagent 時(shí)不要去除細(xì)胞培養(yǎng)基。所以 50 ul Assay Reagent 應(yīng)直接添加到孔上。每個(gè)孔的細(xì)胞培養(yǎng)。)。[每孔總體積變?yōu)?155~160 uL = 100 ul 細(xì)胞 + 5~10 ul 處理 + 50 ul 完整檢測(cè)溶液]

5. 使用 automix 2-3 秒,然后在 1-5 分鐘內(nèi)用光度計(jì)讀取板。(光度計(jì)設(shè)置示例:SpectraMaxL(Molecular Devices):目標(biāo)波長(zhǎng)為 470nm,積分時(shí)間為 0.5 秒,自動(dòng)混合為 2 秒)。

僅供研究使用。不適用于診斷/治療程序。



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